DETERMINACIÓN FUNCIONAL DE FIBRINÓGENO.
Tiempos obtenido en el coagulómetro.
Fundamento.
El fibrinógeno se transforma en fibrina en presencia de exceso de trombina. El tiempo de formación del coagulo en esta practica es inversamente proporcional a la concentración de fibrinógeno presente ne la muestra del plasma. En presencia de altas concentración de trombina el tiempo de formación del coágulo en el plasma es inversamente proporcional a la concentración de fibrinógeno.
El fibrinógeno se transforma en fibrina en presencia de exceso de trombina. El tiempo de formación del coagulo en esta practica es inversamente proporcional a la concentración de fibrinógeno presente ne la muestra del plasma. En presencia de altas concentración de trombina el tiempo de formación del coágulo en el plasma es inversamente proporcional a la concentración de fibrinógeno.
Materiales.
- Pipeta graduada.
- Micropipeta.
- Cubetas de coagulometro.
- Coagulometro.
- Gradilla.
Reactivos.
- R1 : Trombina Bovina.
- R2: Tampón imidazol.
- R3: Solución caolín.
- Coagulation Cal.
Muestra.
Plasma pobre en plaquetas.
Procedimiento.
- Dilución 1/10 con la muestra (PPP) y R2 ( tampón imidazol) .Sería 50 microlitros de muestra más 450 microlitros de R2.
- Tomamos 5 tubos y lo rotulamos según su concentración, que sería 1/40, 1/30.1/20,1/10,1/5.
En el tubo 1/40 se le añade 3,9 ml de R2 y 100 microlitros de coagulation.
En el tubo 1/30 se le añade 2,9 ml de R2 y 100 microlitros de coagulation.
En el tubo 1/20 se le añade 1,9 ml de R2 y 100 microlitros de coagulation.
En el tubo 1/10 se le añade 0,9 ml de R2 y 100 microlitros de coagulation.
En el tubo 1/5 se le añade 0,4 ml de R2 y 100 microlitros de coagulation.
- Añadimos 200 microlitros de cada dilución en cubetas de coagulometro y se le añade 20 microlitros de R3 y lo atemperamos a 37º durante 4 minutos.
- Añadimos 100 microlitros de reactivo R1 y cronometrar la formación del coágulo.
Hoja de trabajo.
1º. ¿ De qué tipo es la determinación de fibrinógeno realizada en esta práctica?
Esta práctica se basa en la medición del tiempo que tarda un exceso de trombina en degradar a fibrina el fibrinógeno presente en un PPP diluido y, por tanto, en formar un coagulo.
2º. ¿A qué concentración está la trombina bovina?
A una concentración de 100 U NIH/ml.
3º. ¿A qué dilución se somete a la muestra?
A 1/10
4.º¿Cuál es la fibrinogenemia normal?
La fibrinogenemia normal oscila entre los 150 y los 450 mg/dl.
4.º¿Cuál es la fibrinogenemia normal?
La fibrinogenemia normal oscila entre los 150 y los 450 mg/dl.
Resultados obtenidos.
Curva del fibrinogeno.
Dilución del plasma calibrador.
|
Concentración.
|
Tiempo en el que coagula.
|
1/40
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0,25*xC
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48,5
|
1/30
|
0,33*xC
|
37,4
|
1/20
|
0,5*xC
|
9,4
|
1/10
|
1*xC
|
142,7
|
1/5
|
2*xC
|
7
|
Tiempo, en segundos, en el que coagula la muestra:
10 segundos.
Valoración de los resultados.
La fibrinogenemia es:
Normal.
Normal.
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