Práctica XLI : P3 (4/03/2015)

DETERMINACIÓN DEL TIEMPO DE PROTROMBINA (TP).

Fundamento.
En esta práctica el reactivo que vamos a utilizar es la tromboplastina histia y del calcio , que recibe el nombre de trombloplastina calcica.
El tromboplastina histica proviene de extractos de cerebro o pulmón de animales.

Materiales.

• Una gradilla.
• Cubeta de coagulómetro.
• Un trocito de acero.
• Rotulador de vidrio.
• Una micropipeta de 100 y 200 microlitros.
• Puntas de pipeta.
• Un coagulómetro.
• Un baño de agua.
• 2 tubos de ensayo de plastico.

Reactivos.

• Tromboplastina cálcica.

Muestra.

Plasma pobre en plaquetas (PPP).

Procedimiento.

Lo primero que hay que hacer es homogeneizar el reactivo sin agitarlo bruscamente.  También debemos atemperar el reactivo y la muestra para ellos podemos meterla en un baño a 37 º durante 5 minutos o tenerla en la mano duran unos minutos.Cuando la muestra  y el reactivo estén atemperados añadimos a una cubeta con una micropipeta 100 microlitros de plasma pobre en plaquetas, que previamente lo hemos conseguido centrifugando la sangre a 3000 rpm durante 10 minutos, y la rotulamos con la letra M; en otra cubeta añadimos 200 microlitros del reactivo (tromboplastina cálcica), el reactivo se tiene que incubar para ello lo colocamos en la celdas del coagulómetro durante 3 minutos. Colocamos la cubeta con la muestra y el reactivo en las celdas del coagulómetro y lo ponemos  en PTT. La cubeta con la muestra la debemos colocar en la celda de medida del coagulómetro y ponerle el tapón rojo encima, y se pulsa el botón de "RESERT" y  en ese momento se le añade con una micropipeta 200 microlitros del reactivo teniendo en cuenta que la punta de la pipeta no puede tocar el tapón rojo porque si lo toca el coagulómetro para de contar, cuando se le añade la tromboplastina cálcica se pone en marcha el magnetoagitador del coagulómetro y comienza la lectura de éste. Cuando se forma el coagulo el coagulómetro finaliza la lectura y nos indica el tiempo que pasa desde la adición de la tromboplastina cálcica.

Interpretación.

Hoja de trabajo.

1º. ¿Qué índice expresa la sensibilidad de una tromboplastina hística?

El ISI.

2º.¿ Cómo se llama la ratio de protrombina corregida?

Se denomina INR.

3º. ¿Cuál es el % normal de actividad de la protrombina?

El 100 -5 de actividad de protrombina.

4º. ¿En qué circunstancias se altera el TP?

Resultado obtenido.

TP de la muestra , en segundos:

37,2 segundos.

% de la actividad de la protrombina contenida en la muestra, obtenido mediante interpolación en la curva actividad preparada previamente:

50%

TP del plasma control normal no diluido (el de 100% de actividad ):

12,3 seg.

Ratio entre el TP de la muestra y el TP del control:

1,32

ISI de la tromboplastina hística utilizada:

1,24

INR=(TP del plasma del paiente/TP  de un plasma control anormal ) ^ ISI
INR = (37,2/12,3)^1,24=3,94

Valoración de os resultados.

La muestra ensayada tiene un TP:

Normal.