DETERMINACIÓN DEL FENOTIPO Y GENOTIPO DEL SISTEMA Rh.
Fundamento.
El objetivo de esta práctica es investigar el genotipo del sistema Rh mediante el enfrentamiento de los hematíes problema con diferentes antisueros dirigidos contra los antígenos que forman el sistema Rh.
Material.
- Tubos de hemólisis.
- Centrífuga.
- Rotulador de vidrio.
- Pipetas Pasteur.
- Gradilla.
Reactivos.
- Suero anti-D.
- Suero anti-E
- Suero anti-C
- Suero anti-e
- Suero anti-c
- Solución salina fisiológica.
Muestra.
Suspensión de hematíes lavados al 5 %.
Para obtener la suspensión de hematíes lo primero que realizamos es el lavados de los hematíes.
Para ello depositamos 1 ml de sangre y lo completamos con 3 ml de solución salina, lo agitamos y lo centrifugamos a 2000 rpm durante 4 minutos. Después desechamos el sobrenadante y volvemos a realizar el paso anterior 2 veces más. En la última centrifugación que realizamos desechamos el sobrenadante y preparamos hematíes al 5%. En un tubo depositamos 5 gotas (250 microlitros) de los hematíes lavados y 5 ml de suero fisiológico lo agitamos y así obtenemos una suspensión al 5 %.
Procedimiento.
Lo primero es rotular cinco tubos, cada uno con la letra D, C, E ,c y e. En cada tubos añadimos una gota del antisuero correspondiente y una gota de la suspensión de hamatíes a 5%. Lo mezclamos suavemente. y por último centrifugamos todos los tubos a 1000 rpm durante 1 minuto.
Hoja de trabajo.
1.¿ Qué antisueros se utilizan en esta técnica ?
Procedimiento.
Lo primero es rotular cinco tubos, cada uno con la letra D, C, E ,c y e. En cada tubos añadimos una gota del antisuero correspondiente y una gota de la suspensión de hamatíes a 5%. Lo mezclamos suavemente. y por último centrifugamos todos los tubos a 1000 rpm durante 1 minuto.
Hoja de trabajo.
1.¿ Qué antisueros se utilizan en esta técnica ?
- Suero anti-D.
- Suero anti-E
- Suero anti-C
- Suero anti-e
- Suero anti-c
2.¿Por qué no existe suero anti-d ?
Porque no existe el antígeno d.
3.¿Qué expresan los cinco resultados obtenidos?
Los cinco resultados obtenidos expresan el fenotipo de la sangre analizada.
4. Si la sangre es Rh + , ¿puede determinarse exactamente su genotipo con respecto al sistema Rh?
No, si la sangre es Rh positivo (D+) existen varios genotipos posibles que dan lugar al fenotipo previamente detectado.
5.Si los resultados obtenidos son: D-, C-, E+, c+ y e- ; ¿ cuál es el genotipo posible de esta sangre?
Según nomenclatura de Fisher- Race los genotipos posibles son: dcE / dcE
Resultado obtenido.
Tubo
|
Aglutinación
|
D
|
-
|
C
|
+
|
E
|
+
|
c
|
+
|
e
|
no.
|
Valoración de los resultados.
El/los genotipo/s posible/s del sistema Rh en la sangre analizada es/son: dCe / dcE y dCE/ dce
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