TINCIÓN DE WRINGH.(12/11/2014)

MATERIALES.

• Microscopio
• Cristalizador
• Puentes de tinción
• Pipetas Pasteur
• Frasco lavador
• Guantes
• Tubos de ensayo

REACTIVOS.

• Solución de eosina-azul de metileno según Wringht
• Solución tampón pH 7,2.
• Aeite de inmersión.

FUNDAMENTO.

Utilizaremos un colorante que es una disolución de eosina y unas mezcla de azul de metileno (del 50 al 75 % ) u azul B ( del 10 al 25 %) juntos con derivados del alcohol etílico.

MUESTRA.

Sangre venosa anticoagulada.

PROCEDIMIENTO.

Tenemos que realizar un frotis sanguíneo muy fino y debemos dejarla secar. Esta extensión lo colocaremos horizontalmente encima del puente de tinción que esta situado encima del cristalizador; a este frotis le vertemo mediante una pipeta 1 ml de colorante Wringh (eosina azul de metileno ) dejamos actuar durante 1 minuto y lo lavamos con tampón pH 7,2. Lo dejamos secar y escurrir en vertical dentro del cristalizador.  Después mediante la pipeta pasteur diluimos en un tubo de ensayo  0,5 ml  de eosina-azul de metileno en 0,5 ml de tampón pH 7,2 se tiene que mezlar bien y mediante una pipeta pasteur cubrimos el frotis con esta dilución,,dejando que se tiña durante 3-5 minutos. A continuación lavarla on agua del grifo y después con solución tampón pH 7,2. La dejamos secar y escurrir en vertical dentro del cristalizador. Finalmente la observamos en el microscopio con el objetivo 100x.

RESULTADOS.

Las células se observan con el mismo color que la observada con la tinción de Giemsa.

HOJA DE TRABAJO.

1º ¿ Qué tipo de colorante utilizamos en esta tinción?

El colorante utilizado es una solución de eosina una mezcla de azul de metileno y azur B

2º¿ Qué sustancia utilizamos como  fijador ?

Eosina-azul de metileno

3º ¿ Cuánto tiempo debe estar en contacto el frotis con el colorante diluido ?

3-5 minutos.