TINCIÓN SUPRAVITAL CON AZUL DE METILENO. (6/11/2014)

MATERIALES.

Microscopio óptico.

Portas y cubres.

Tubos de hemólisis

Capilares.

Papel parafilm

Pipeta pasteur.

Lanceta.

REACTIVOS.

1. Azul de metileno nuevo.
2. Oxalato potásico.
3. Agua destilada.

MUESTRA.

Sangre capilar fresca es lo que utilice para esta práctica, aunque también se puede con sangre venosa antioagulada.

FUNDAMENTO.

En esta practica se utilizara como colorante el azul de metileno. Este colorante tiñe principalmente los núcleos celulares y es un colorante vital.

PROCEDIMIENTO.

Lo primero que tenemos que hacer es preparar el colorante, con lo cual vamos a utilizar los siguientes reactivos:

Azul de metileno nuevo ( 0,5g) ; Oxalato potásico (1,6g) y agua destialada (100ml).Pesamos en un vidrio de roloj 0.5 g de azul de metileno y 1.6 de oxalato potásico y en un vaso de precipitado lo disolvemos en 100 ml de agua destilada.

Después tenemos que realizar la punción en la yema del dedo para extraer una gota de sangre fresca, lo primero que hay que hacer es desinfectar la zona con alcohol y secarle para a continuación realizar la punción con una lanceta, la primera gota hay que desecharla. 

Una vez realizado los pasos anteriores tenemos que depositar dos gotas de sangre, mediante un capilar,  en el portaobjeto también tenemos que depositar dos gotas de colorante y enseguida aspiramos la mezcla con una pipeta pasteur y la depositamos en el tubo de hemólisis; también podemos depositar directamente las dos gotas de sangre fresa y las dos gotas de colorante en el tubo de hemólisis.

Tapamos el tubo con papel parafilm y dejamos reposar la mezcla unos 10 minutos. Pasado este tiempo aspiramos con una pipeta pasteur esta mezcla y la depositamos en un portaobjetos y la cubrimos con un cubreobjetos. Por último la observamos en el microscopio con el objetivo de 40x.

RESULTADO.

Observamos los núcleos celulares teñidas 

HOJA DE TRABAJO.

1º ¿ En qué se diferencia una tinción vital de una supravital ?

Las tinciones vitales consisten en la introducción de un colorante en la circulación de un organismo vivo y las tinciones supravitales emplean el colorante sobre células o tejidos vivos aislados del organismo.

2º¿ Cuáles son los colorantes vitales más utilizados?

Los colorantes vitales más utilizados son el rojo neutro, el verde Jano y el Azul de metileno.

3º¿ Qué tipo de estructuras tiñe seletivamente el verde Jano?

El verde Jano tiñe mitocondrias y otros orgánulos celulares.

4º¿Cuáles son las ventajas de una tinción supravital ?

5º¿Cuáles son los inconvenientes ?