RECUENTO DE HEMATÍES.
Fundamento.
Para el recuento de hematíes lo que se debe de hacer el diluir la sangre en el líquido de dilución mediante una pipeta de Thoma. Finalmente esto se extendiendo en una cámara de recuento.
Material.
- Una pipeta de Thoma para glóbulos rojos.
- Un tubo de goma con boquilla.
- Una cámara de recuento.
- Un cubre.
- Un microscopio.
- Papel de filtro
- Tubo de ensayo.
- Gradilla.
Reactivos.
Líquido de dilución. El que vamos a utilizar, que es el más utilizado, es el de Hayem.
El líquido de Hayem se compone de:
- 2,5 g de sulfato sódico.
- 0,5 g de cloruro sódico.
- 0,25 g de cloruro mercurio.
- 100 ml de agua destilada.
Para la limpieza de la pipeta de Thoma necesitaremos.
- Agua corriente.
- Agua destilada.
- Alcohol.
Muestra.
Sangre venosa.
Procedimiento.
Lo primero que debemos de hacer es tener en un tubo sangre venosa y en otro tubo de ensayo el líquido de dilución. Con la pipeta de Thoma vamos a aspirar sangre venosa hasta la señal de 1, limpiaremos la parte exterior de la pipeta con una gasa teniendo en cuenta que no tocamos la punta de la pipeta y después aspiramos el líquido de dilución hasta la señal de 101. Una vez realizado este paso cogemos con los dedos pulgar e índice la pipeta de Thoma ,previamente desganchamos el tubo de goma, y la agitamos suavemente durante unos minutos. En un tubo desechamos las tres primeras gotas que corresponde con el líquido que no esta mezclado con sangre.
En la cámara de recuento debemos colocar un cubre, esto lo hacemos mojando un dedo y con el dedo humedo lo pasamos por las bandas laterales, y colocamos el cubre entre esas bandas. Cuando tengamos la cámara con el cubre, colocamos la pipeta de Thoma en posicion casi vertical en el borde apropiado es decir en el centro de la cámara y dejamos caer una gota entre el cubre y la cámara lo mismo debemos de hacer para el borde que se encuentra enfrente. Como se observa en la siguiente imagen.
Lo dejamos reposar durante unos minutos y lo colocamos en la platina para observarlo con el objetivo de 40x y el condensador a baja altura. Debemos de contar lo hematíes presentes el 5 cuadrados, es decir en los cuatro cuadrados que se encuentran en los entremos superiores e inferiores y en cuadro que se encuentran en el centro.
Para evitar contar los mismo hematíes solo se contaran los que están contenidos dentro del cuadrado y los que están en contacto con las líneas de demarcación superior y derecha; y los cuadrados se cuentan siguiendo un orden en Zig Zag.
Resultado.
RBC= HX5X10XD
- RBC= Recuento de hematíes ( número de hematíes por mm3 de sangre)
- H = hematíes contados en 5 cuadrados medianos.
- :D= factor de dilución (100)
Total:117 hematíes.
Cuadrado del
extremo superior de la izquierda.
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6
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6
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12
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7
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7
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6
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11
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5
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7
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13
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2
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3
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8
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7
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11
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6
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Total=127 hematíes.
Cuadrado
del extremo superior de la derecha.
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6
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10
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8
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8
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8
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13
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11
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5
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6
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8
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16
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5
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6
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5
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8
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4
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Total=158 hematíes.
Cuadrado
central.
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7
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12
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17
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13
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12
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9
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6
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14
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8
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11
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7
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5
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5
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12
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9
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11
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Total=191 hematíes.
Cuadrado
del extremo inferior de la izquierda.
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9
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8
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10
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4
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10
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13
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16
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12
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12
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19
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14
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13
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9
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8
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14
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20
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Total=170 hematíes.
Cuadrado
del extremo inferior de la derecha.
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10
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9
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4
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12
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10
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12
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14
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16
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10
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12
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11
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12
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14
|
8
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5
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11
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RBC=3815000 hematíes/ mm3
H= 117+127+158+191+170=763 hematíes.
D=100
RBC= 763x5x10x100 = 3815000 hematíes/mm3
Hoja de trabajo.
1º ¿ Qué se debe hacer si el líquido de Hayem contiene precipitados?
Si contiene precipitados, antes de usarlo deberá ser filtrado.
2º ¿ Cuál es el volumen de sangre diluido que hay sobre cada uno de los cuadrados pequeños donde se han contado los hematíes?
0,00025 mm3 de sangre.
3º¿ Cuál es el volumen de sangre diluida que hay sobre cada uno de los cuadrados medianos donde se han contado los hematíes?
0,004 mm3 de sangre.
4º¿ Cuál es el volumen de sangre diluida que hay sobre el cuadrado central ?
0,1 mm3 de sangre.
5º Si la pipeta Thoma se enrasa con sangre hasta la señal de 1 ¿ cuál es la dilución posteriormente obtenida?
Una dilución de 1/100.
Una dilución de 1/100.
6º Si la sangre se diluye a 1/200 y se cuentan 450 hematíes en 5 cuadrados medianos , ¿ cuál es el RBC obtenido ?
RBC= Hx5x10xD
H= 450 hematíes.
D=200
RBC= 450x5x10x200 =4500000 hematíes/mm3
Resultado obtenido.
Hematíes contados en 5 cuadrados medianos= 763 hematíes.
Factor de dilución = 1/100
RBC= 3815000 hemtíes /mm3
Valoración de los resultados.
Sexo de la persona a la que pertenece la sangre= masculino.
El RBC obtenido es : Bajo.
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