RECUENTO DE PLAQUETAS CON HEMOCITÓMETRO.
Fundamento.
En esta practica vamos a liduir la sangre en un liquido apropiado y lo depositaremos en una cámara de recuento.
Materiales.
- Tubo de ensayo.
- Pipeta diluidora de Thoma, para recuento de glóbulos rojos.
- Tubo de goma.
- Gasa
- Cámara de recuento.
- Cubre
- Microcopio.
- Placa petri
- papel de filtro.
Reactivos.
- Agua destilada.
- Liquido de dilución suministrado por los Laboratorios Spinreact.
Muestra.
Sangre venosa.
Procedimiento.
Vertemos el liquido de dilución en un tubo de ensayo, con la pipeta de thoma aspiramos la sangre gasta la señal de 1 y limpiamos con una gasa el exterior , después aspiramos el líquido de dilución hasta la señal de 101 de la pipeta. Agitamos el tubo tomandolo con el pulgal y el indice durante 5 minutos,desechamos las 5 primeras gotas. Después tenemos que colocar un cubre en la cámara y cargar correctamente la cámara de recuento . La cámara la colocamos en el interior de placa petri en cuyo interior se deposita un papel de filtro embebido con agua, se deja durante 15 minutos. Por último la observamos en el microscopio con el objetivo de 40x.
Resultado.
PLT/mm3=Px1000
P=535x1000 = 535000 plaquetas por mm3.
Hoja de trabajo.
1º. ¿Qué tipo de pipeta diluidora se utiliza en el recuento de plaquetas?
Una pipeta diluidora de Thoma,para recuento de glóbulos rojos.
2º. ¿Qué funciones desempeña el líquido de dilución empleado?
Este líquido rompe los hematíes, evita la agregación de las plaquetas entre sí y su adhesión a otros elementos, y facilita la visualización de las plaquetas al hacerlas refrigentes.
3º. ¿Cuánto líquido de dilución se necesita para efectuar un ensayo ?
1 ml
4º. ¿Con qué se puede preparar una cámara húmeda?
Se puede preparar una cámara húmeda con una placa petri cerrada en cuyo interior se deposita un papel de filtro embebido en agua.
5º.¿Con qué objetivo se cuentan las plaquetas ?
Con el objetivo de 40x.
6º. ¿Cómo se aprecian los trombocitos en este recuento?
Se observan como corpúsculos redondeados u ovalados de tamaño muy pequeño y muy refringentes.
Procedimiento.
Vertemos el liquido de dilución en un tubo de ensayo, con la pipeta de thoma aspiramos la sangre gasta la señal de 1 y limpiamos con una gasa el exterior , después aspiramos el líquido de dilución hasta la señal de 101 de la pipeta. Agitamos el tubo tomandolo con el pulgal y el indice durante 5 minutos,desechamos las 5 primeras gotas. Después tenemos que colocar un cubre en la cámara y cargar correctamente la cámara de recuento . La cámara la colocamos en el interior de placa petri en cuyo interior se deposita un papel de filtro embebido con agua, se deja durante 15 minutos. Por último la observamos en el microscopio con el objetivo de 40x.
Resultado.
PLT/mm3=Px1000
P=535x1000 = 535000 plaquetas por mm3.
Hoja de trabajo.
1º. ¿Qué tipo de pipeta diluidora se utiliza en el recuento de plaquetas?
Una pipeta diluidora de Thoma,para recuento de glóbulos rojos.
2º. ¿Qué funciones desempeña el líquido de dilución empleado?
Este líquido rompe los hematíes, evita la agregación de las plaquetas entre sí y su adhesión a otros elementos, y facilita la visualización de las plaquetas al hacerlas refrigentes.
3º. ¿Cuánto líquido de dilución se necesita para efectuar un ensayo ?
1 ml
4º. ¿Con qué se puede preparar una cámara húmeda?
Se puede preparar una cámara húmeda con una placa petri cerrada en cuyo interior se deposita un papel de filtro embebido en agua.
5º.¿Con qué objetivo se cuentan las plaquetas ?
Con el objetivo de 40x.
6º. ¿Cómo se aprecian los trombocitos en este recuento?
Se observan como corpúsculos redondeados u ovalados de tamaño muy pequeño y muy refringentes.
Valoración de los resultados.
El número de plaquetas obtenida es:
Normal.
Recuento de plaquetas utilizando micropipeta.
Procedimiento.
- Con una micropipeta tomamos 5 microlitros de sangre y los añadimos en un tubo de ensayo.
- Después tomamos 495 microlitros de diluyente.
- Lo mezclamos y con una micropipeta tomamos 50 microlitros de esta dilución y cargamos la cámara de recuento.
- Observamos con el microscopio con el objetivo de 40x.
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