Practica XXXII: P1 (08/01/2015)

ESTUDIO DE UN CONCENTRADO DE LEUCOCITOS.

Fundamento.

 La base de esta practica es centrifugar un tubo lleno de sangre, cuando la centrifugamos a una velocidad y un tiempo determinado se consigue la separación de las células sanguínea en tres capas. 

Así obtenemos:

• Una primera capa inferior compuesta por eritrocitos.
• La capa media llamada capa leucoplaquetaria o  Buffy Coat) formada por leucocitos y plaquetas.
• Y la última capa, la capa superior es el plasma.

Materiales.

• Tubo de centrifuga.
• Una centrifuga.
• Cuatro portaobjetos.
• Una pipeta Pasteur, pero también se puede utilizar micropipeta.

Reactivos.

Hemos teñido el frotis con la tinción de panóptico rápido, por lo tanto los reactivos serían;

• Solución nº 1: Solución alcohólica de triarilmetano.
• Solución nº 2: Solución tamponada de xantano.
• Solución nº3: Solución tamponada de tiazino.

Muestra.

Sangre venosa anti-coagulada con citrato sódico.

Procedimiento.

El primer paso sería mezclar la sangre con el anticoagulante, pero la sangre ya venia anticoagulada con citrato sódico. Una vez obtenida la sangre anticoagulada la introducimos en la centrifugadora durante 15 minutos a una velocidad de 1500 rpm. Pasado este tiemo saco el tubo con la sangre separada en tres capas y con ayuda de una micropipeta  retiramos el plasma. Después tomamos con la micropipeta 0.2 ml de la capa leucoplaquetaria ( al realizar este paso hay que tener cuidado de no tomar nada de la capa eritrocitaria). 

Colocamos una gota en un portaobjetos para realizar un frotis. Una vez obtenido el frotis lo teñimos con el panóptico rápido que consistia en introducirlo 5 veces independientemente en las tres soluciones y por último lavarlo con agua destilada.

Resultado.
Se observa leucocitos de todos los tipos ( neutrófilos, linfocitos, eosinófilos, basófilos) y también se pueden observar plaquetas.

Hoja de trabajo.

1.º ¿ Cómo se llama a la condensación del material genético inactivado de un cromosoma x?

Se llama obtención de células para la búsqueda del corpúsculo de barr.

2.º ¿ Qué otro nombre recibe la capa leucoplaquetaria ?

Recibe el nombre de buffy coat.

3.º Tras centrifugar la sangre, ¿ en que capa se sitúan hematíes?

En la capa eritrocitaria.

Valoración de los resultados.
En la sangre estudiada:
No hay leucocitos con alteraciones.